يافته‌هاي جديد پژوهشگران ايراني در خصوص تمايز سلول‌هاي بنيادي مغز استخوان

۱۳۸۷/۱۲/۲۲ - ۱۰:۳۵ - کد خبر: 15471
يافته‌هاي جديد پژوهشگران ايراني در خصوص تمايز سلول‌هاي بنيادي مغز استخوان
سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي مشتق از مغز استخوان انسان (hBMSCs) توانايي بالقوه‌اي در تمايز به برخي از سلول‌ها نظير سلول‌هاي چربي، استخواني و كبدي را دارند.

هدف از اين پژوهش كه توسط دكتر مريم جزايري در قالب رساله دكتري تخصصي وي انجام و ارائه شد، در مرحله اول بهينه‌سازي شرايط كشت سلول جهت تمايز سلول‌هاي مزانشيمال مغز استخوان به سلول‌هاي آندوتليال و سپس ارزيابي بيان شاخص‌هاي اختصاصي آندوتليال جهت تائيد سلول‌هاي تمايزيافته و تغييرات بيان پروتئين بتاكاتنين طي روند تمايز بود. هدف بعدي توانايي سلول‌هاي آندوتليال تمايز يافته در تشكيل شبكه مويرگي در in vitro و in vivo و نيز تغييرات فراساختاري در سلولهاي تمايز يافته است.

بدين منظور ابتدا سلول‌هاي مزانشيمي از مغز استخوان افراد سالم اهدا كننده جداسازي شدند و تائيد حضور ماركرهاي سطحي آنها توسط روش فلوسيتومتري انجام شد. سپس بهينه سازي شرايط كشت تمايز سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي به سلول‌هاي آندوتليال در حضور فاكتور رشد آندوتليال عروقي (VEGF) و فاكتور رشد شبه انسولين (IGF-1) انجام شد.

براي تائيد سلول‌هاي تمايز يافته از روش‌هاي ايمونوسيتوشيمي، فلوسيتومتري و RT-PCR استفاده شد و روش‌هاي الايزا، وسترن بلات و فلوسيتومتري براي تعيين تغيرات بيان پروتئين بتا - كاتنين در روزهاي مختلف تمايز مورد استفاده قرار گرفتند. سپس قابليت سلول‌هاي تمايزيافته در ايجاد شبكه مويرگي (توبولوژنر) روي بستر ژل ماتريكس خارج سلولي(ECM) در in vitro بررسي شد و نيز تغييرات فراساختاري سلول‌ها با استفاده از ميكروسكوپ الكتروني مورد بررسي قرر گرفت.

در مطالعه in vivo، سلول‌هاي تمايز يافته 24 ساعت قبل از تزريق به بافت زير جلدي موش با ماركر BrdU نشاندار شدند و پس از يك ماه از نمونه‌هاي بافتي رنگ‌آميزي ايمونوهيستوشيمي double staining به عمل آمد.

نتايج حاصل نشان داد كه حدود 85 درصد سلول‌هاي تمايزيافته توانائي تشكيل شبكه شبه مويرگي را روي بستر نيمه جامد ECM دارا بودند و نيز مطالعات فراساختاري سلول‌هاي تمايز يافته نشان داده بود كه اين سلول‌ها داراي ارگان‌هاي اختصاصي آندوتليال مي‌باشند. همچنين سلول‌هاي تمايز يافته توانائي شركت در توبولوژنز را در سيستم in vivo دارا بودند.

نتايج به دست آمده حاكي از آن است كه ويژگي‌هاي بيوشيميايي و مرفولوژيكي سلول‌هاي آندوتليال تمايز يافته از سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي در ارتباط با خصوصيات فراساختاري سلول‌هايي است كه توانائي تشكيل شبكه‌هاي مويرگي را دارند. از سوي ديگر كاهش بيان پروتئين بتاكاتنين همزمان با تمايز به عنوان شاخصي براي شروع تمايز است.

گفتني است اين پژوهش با راهنمائي دكتر عبدالامير علامه و با مشاوره دكتر مسعود سليماني، اعضاي هيات علمي دانشگاه تربيت مدرس انجام شد.
نظر خود را بنویسید
(ضروری)
(ضروری)
CAPTCHA Imagereload
2.6106s, 18q